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PURIFICAÇÃO E CARACTERIZAÇÃO DE PROTEÍNAS
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Seqüenciamento de Proteínas
A primeira proteína cuja sequência foi determinada foi o hormônio insulina bovina. Sua sequência completa foi divulgada em 1953 por Frederick Sanger ( que mais tarde desenvolveu o método da terminação de cadeia para o sequenciamento do DNA: seção3-4C), que estabeleceu definitivamente que as proteínas possuem uma estrutura covalente única. As sequências de aminoácidos de centenas de milhares de polipeptídeos são conhecidas atualmente. Essa informação é muito útil pelas seguintes razões:
1.O conhecimento da seqüência de aminoácidos de uma proteína é um pré-requisito para determinar sua estrutura tridimensional e é essencial para entender seus mecanismos moleculares de ação.
2. A comparação das seqüências entre proteínas análogas de espécies diferentes fornece elementos para entender a sua função e revela as relações evolucionárias entre as proteínas e os organismos que as produzem.
3. Muitas doenças herdadas geneticamentes são causadas por mutação que levaram a troca de um aminoácido na proteína.A análise da seqüência de aminoácidos pode ajudar no desenvolvimento de testes diagnósticos e de terapias eficazes.
A determinação de sequência dos 51 resíduos da insulina levou cerca 10 anos e requereu o uso de ~ 100g de proteína. Desde de então os procedimentos de determinacao da estrutura…
A primeira proteína cuja sequência foi determinada foi o hormônio insulina bovina. Sua sequência completa foi divulgada em 1953 por Frederick Sanger ( que mais tarde desenvolveu o método da terminação de cadeia para o sequenciamento do DNA: seção3-4C), que estabeleceu definitivamente que as proteínas possuem uma estrutura covalente única. As sequências de aminoácidos de centenas de milhares de polipeptídeos são conhecidas atualmente. Essa informação é muito útil pelas seguintes razões:
1.O conhecimento da seqüência de aminoácidos de uma proteína é um pré-requisito para determinar sua estrutura tridimensional e é essencial para entender seus mecanismos moleculares de ação.
2. A comparação das seqüências entre proteínas análogas de espécies diferentes fornece elementos para entender a sua função e revela as relações evolucionárias entre as proteínas e os organismos que as produzem.
3. Muitas doenças herdadas geneticamentes são causadas por mutação que levaram a troca de um aminoácido na proteína.A análise da seqüência de aminoácidos pode ajudar no desenvolvimento de testes diagnósticos e de terapias eficazes.
A determinação de sequência dos 51 resíduos da insulina levou cerca 10 anos e requereu o uso de ~ 100g de proteína. Desde de então os procedimentos de determinacao da estrutura…
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