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Eletroporação
Enquanto a transformação via Agrobacterium exige compatibilidade entre a bactéria e o vegetal a ser transformado, a eletroporação pode ser utilizada em qualquer vegetal em que o método for otimizado. Isto porque este método baseia-se em características físico-químicas comuns a todas as membranas biológicas. A eletroporação baseia-se na introdução de DNA exógeno em células expostas a um campo elétrico. Este, polariza as regiões hidrofílicas dos fosfolipídios presentes nas membranas celulares, causando repulsões e consequentemente, poros transitórios na membrana, por onde o DNA pode ser introduzido na célula-alvo. Este DNA é colocado em uma solução juntamente com as células vegetais que serão transformadas. Tais células, geralmente são protoplastos, ou seja, células onde a parede celular foi removida enzimaticamente, para facilitar a transformação. A produção destes protoplastos, muitas vezes limita o uso desta metodologia, pois inicialmente, um método de obtenção e regeneração destes, deve ser desenvolvido para cada vegetal a ser transformado.
Biolística
Para contornar os problemas oferecidos pelas demais metodologias, foi desenvolvido um método de bombardeamento de células por micropartículas, geralmente de ouro. Assim, estas…
Enquanto a transformação via Agrobacterium exige compatibilidade entre a bactéria e o vegetal a ser transformado, a eletroporação pode ser utilizada em qualquer vegetal em que o método for otimizado. Isto porque este método baseia-se em características físico-químicas comuns a todas as membranas biológicas. A eletroporação baseia-se na introdução de DNA exógeno em células expostas a um campo elétrico. Este, polariza as regiões hidrofílicas dos fosfolipídios presentes nas membranas celulares, causando repulsões e consequentemente, poros transitórios na membrana, por onde o DNA pode ser introduzido na célula-alvo. Este DNA é colocado em uma solução juntamente com as células vegetais que serão transformadas. Tais células, geralmente são protoplastos, ou seja, células onde a parede celular foi removida enzimaticamente, para facilitar a transformação. A produção destes protoplastos, muitas vezes limita o uso desta metodologia, pois inicialmente, um método de obtenção e regeneração destes, deve ser desenvolvido para cada vegetal a ser transformado.
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Para contornar os problemas oferecidos pelas demais metodologias, foi desenvolvido um método de bombardeamento de células por micropartículas, geralmente de ouro. Assim, estas…
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