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Perfil Hormonal de ratos Wistar machos submetidos a aplicação de selante dentário no período pré-púbere
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Verificação da separação do prepúcio
A monitoração da separação do prepúcio será iniciada no 33.º dia de idade para todos os animais de todos os grupos, realizada uma vez ao dia, no momento da pesagem, até a constatação da separação completa da pele.
Coleta de tecidos
Sangue
A coleta será realizada aos 53 dias de idade para todos os animais. Os animais serão anestesiados através de anestesia geral (quetamina + xilazina) e a coleta realizada através de punção cardíaca. As amostras de sangue serão colhidas em tubos contendo gel separador, centrifugados a 5.000 rpm por 10 minutos. O soro será separado, acondicionado em tubo Ependorf e congelado a -18.ºC para posterior análise hormonal por radioimunoensaio.
Testículos
Após o sacrifício, os testículos serão retirados, pesados e fixados em solução de formaldeído a 10% para realização de histologia.
Radioimunoensaios
Serão dosadas as concentrações séricas de testosterona e estradiol, através de kits de dosagens hormonais no Laboratório de Dosagens Hormonais LDH do Departamento de Reprodução Animal da FMVZ USP.
As informações obtidas serão de evolução de peso corporal, idade quando do descolamento do prepúcio, dosagens de testosterona, estradiol, peso e volume testicular e morfologia celular, que deverão ser correlacionadas com as diferentes aplicações dentária de selante nos grupos.
Todas as variáveis serão primeiramente analisadas quanto a sua distribuição…
A monitoração da separação do prepúcio será iniciada no 33.º dia de idade para todos os animais de todos os grupos, realizada uma vez ao dia, no momento da pesagem, até a constatação da separação completa da pele.
Coleta de tecidos
Sangue
A coleta será realizada aos 53 dias de idade para todos os animais. Os animais serão anestesiados através de anestesia geral (quetamina + xilazina) e a coleta realizada através de punção cardíaca. As amostras de sangue serão colhidas em tubos contendo gel separador, centrifugados a 5.000 rpm por 10 minutos. O soro será separado, acondicionado em tubo Ependorf e congelado a -18.ºC para posterior análise hormonal por radioimunoensaio.
Testículos
Após o sacrifício, os testículos serão retirados, pesados e fixados em solução de formaldeído a 10% para realização de histologia.
Radioimunoensaios
Serão dosadas as concentrações séricas de testosterona e estradiol, através de kits de dosagens hormonais no Laboratório de Dosagens Hormonais LDH do Departamento de Reprodução Animal da FMVZ USP.
As informações obtidas serão de evolução de peso corporal, idade quando do descolamento do prepúcio, dosagens de testosterona, estradiol, peso e volume testicular e morfologia celular, que deverão ser correlacionadas com as diferentes aplicações dentária de selante nos grupos.
Todas as variáveis serão primeiramente analisadas quanto a sua distribuição…
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