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Estudo Funcional de Mutantes da Proteína Prion Celular Associados à Doenças por Prion
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2.1 OBJETIVO GERAL
Avaliação dos mecanismos relacionados à possível perda de função das proteínas prion celular com mutações associadas à doenças genéticas por prions.
2.2 OBJETIVOS ESPECÍFICOS
I- Validar linhagem neural knockout para PrPC como modelo de estudo nas funções de PrPC.
II- Construção dos vetores de expressão dos mutantes de PrPC murino P101L, P104L, A116V, D177N, V1179I, T182A e E199K associados
ao polimorfismo metionina ou valina no códon 128.
III- Transfecção dos vetores de expressão dos mutantes de PrPC murino em linhagem celular knockout para PrPC e selecão das populações celulares transfectadas.
IV- Avaliação da expressão celular e das características bioquímicas dos diferentes mutantes de PrPC.
V- Análise da proliferação celular em cada uma das linhagens expressando os diferentes mutantes de PrPC.
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