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Atividade Funcional da Proteína Prion Celular com o Polimorfismo N171S e a Mutação D178N Presentes no Domínio de Ligação à Lâmina
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2.1 GERAL
Avaliar a influência de PrPC com o polimorfismo N171S e a mutação D178N, associados ou não ao polimorfismo 129M ou 129V no padrão de glicosilação e distribuição subcelular de PrPC e suas possíveis conseqüências na migração celular mediada por laminina.
2.2 ESPECÍFICOS
- Construção das quimeras GFP-PrPC 129M, GFP-PrPC 129V, GFP- PrPC 129M/171S, GFP-PrPC 129V/171S, GFP-PrPC 129M/178N e
- Análise da distribuição subcelular de cada uma das construções em comparação com GFP-PrPC 129M (tipo-selvagem) através de microscopia confocal;
- Análise do padrão de glicosilação de PrPC contendo essas alterações utilizando SDS-PAGE;
- Avaliação da migração celular induzida por Ln em células expressando o polimorfismo 171S e o mutante 178N em PrPC.
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