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Atividade Funcional da Proteína Prion Celular com o Polimorfismo N171S e a Mutação D178N Presentes no Domínio de Ligação à Lâmina
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A natureza físico-química do agente causador das TSEs foi intensamente estudada e este apresentou uma resistência incomum a agentes desnaturantes de ácidos nucléicos como altas temperaturas, tratamento com formaldeído, radiações de UV e raios X, ao passo que era sensível a agentes modificadores de proteína como proteinase K, uréia, fenol e SDS. Estas observações conduziram à hipótese de que o agente poderia ser constituído unicamente de proteína, desprovido de ácidos nucléicos. Posteriormente, PRUSINER (1998) isolou o agente causador da doença de cérebros de hamsters doentes e denominou-o de “proteinaceus
infectious particles” ou prion, distinguindo-o de patógenos convencionais como vírus e bactérias.
A purificação da partícula infecciosa permitiu a produção de anticorpos que foram capazes de reconhecer uma proteína de 27-30 kiloDaltons (kDa) em extrato de cérebro de animais doentes e submetidos ao tratamento com proteinase K. Esta estava ausente nos extratos de animais não doentes. Curiosamente, nos extratos protéicos não submetidos à proteólise, os anticorpos reconheciam uma banda com cerca de 30-35kDa, tanto de animais infectados quanto de animais não infectados. Isto indicava que em animais sadios havia uma proteína homóloga a do agente infeccioso (OESCH et al. 1985). O seqüenciamento da região amino-terminal da molécula reconhecida por este anticorpo tornou possível a síntese de oligonucleotídeos degenerados e a…
infectious particles” ou prion, distinguindo-o de patógenos convencionais como vírus e bactérias.
A purificação da partícula infecciosa permitiu a produção de anticorpos que foram capazes de reconhecer uma proteína de 27-30 kiloDaltons (kDa) em extrato de cérebro de animais doentes e submetidos ao tratamento com proteinase K. Esta estava ausente nos extratos de animais não doentes. Curiosamente, nos extratos protéicos não submetidos à proteólise, os anticorpos reconheciam uma banda com cerca de 30-35kDa, tanto de animais infectados quanto de animais não infectados. Isto indicava que em animais sadios havia uma proteína homóloga a do agente infeccioso (OESCH et al. 1985). O seqüenciamento da região amino-terminal da molécula reconhecida por este anticorpo tornou possível a síntese de oligonucleotídeos degenerados e a…
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