UNIVERSIDADE DE PERNAMBUCO UPE
FACULDADE DE FORMAÇÃO DE PROFESSORES DE NAZARÉ DA MATA FFPNM
CURSO DE LICENCIATURA EM CIÊNCIAS BIOLÓGICAS EAD
ARLYS JERÔNIMO DE OLIVEIRA LIMA LINO CARNEIRO
INVESTIGAÇÃO DA OCORRÊNCIA DE LECTINAS NA ESPÉCIE Sideroxylon obtusifolium ATRAVÉS DE ENSAIOS DE HEMOAGLUTINAÇÃO E INIBIÇÃO POR CARBOIDRATO
NAZARÉ DA MATA, 2010
LISTA DE ABREVIATURAS
AH: atividade hemaglutinante;
AHE: atividade hemaglutinante específica;
BSA: curva padrão de albumina sérica bovina
DP: Dosagem Protéica
DNA: Ácido desoxirribonucleico
EB: Extrato bruto
IAH: inibição da atividade hemaglutinante;
FR: Fração
FS: Fracionamento Salino
Gal: Galactose
GalNAc: N-acetilgalactosamina
GlcNAc: N-acetilglicosamina
h: Hora
M: Molar
mM: Milimolar
P: Página
pH: Potencial de hidrogênio
p/v: Peso por volume
rpm: Rotação por minuto
V: Volume
v/v: Volume por volume
mg: Micrograma
mg/ml: Micrograma por mililitro.
ml: Microlitro
ml: mililitro
ml/h: Mililitro por hora
min: Minutos
nm: Nanômetro
ºC: Graus Celsius
NaCl: Cloreto de sódio
et. al.: E outros
CARNEIRO, Arlys Jerônimo de Oliveira Lima Lino Carneiro. Investigação da Ocorrência de Lectina na Espécie Sideroxylon Obtusifolium Através de ensaios de Hemoaglutinação e Inibição por Carboidrato. 2010. 65 f. Monografia (Trabalho de Conclusão de Curso) Licenciatura em Biologia a Distância da Faculdade de Formação de Professores de Nazaré da Mata: UPE, Nazaré da Mata, 2010.
RESUMO
Este trabalho de pesquisa visou expor a importância das plantas para a obtenção de produtos bioativos, mais precisamente lectinas, com finalidades diversas. Em nossos estudos buscamos discorrer a cerca da espécie Sideroylon obtusifolium, dada sua utilização na medicina popular, e investigar a presença de lectinas na espécie. Durante os estudos laboratorias, utilizando extrato da planta, realizado com tampão citrato fosfato, pH 6.5, na concentração a 10%, foi verificada uma atividade hemaglutinante relativamente expressiva com o resultado de AH 131.072, onde esta atividade foi realizada utilizando-se de eritrócitos do sangue de coelho. Pode-se confirmar a presença da lectina na espécie através do teste de hemoaglutinação. Após a determinação da Atividade Hemaglutinante, foi realizado ensaio de dosagem protéica que efetuada utilizando-se da curva padrão de albumina sérica bovina (BSA), com valores compreendidos entre 0 e 500 mg. A estimativa da concentração protéica relativa foi efetuada através de leitura espectrométrica a 280 nm e obteve o resultado de 36,62mg/ml. As frações com concentração entre 40-60% obtiveram melhores resultados nos testes de hemoaglutinação e leitura espectrofométrica. Durante os testes de inibição da atividade hemaglutinante foi percebido que a proteína foi inibida pelo carboidrato N-acetil-D-glicosamina, carboidrato esse que é o principal componente das paredes celulares de fungos e de algumas bactérias. Desta maneira, a continuação do trabalho de purificação da lectina contida na espécie Sideroxylon obtusifolium é de grande importância para a indústria farmacêutica dada a provável diversidade de atividade biológica desta lectina.
Palavras-chave: plantas medicinais, lectinas, Sideroxylon obtusifolium.
ABSTRACT
This work aimed show the importance of components with biological activity from plants, more precisely lectins, with several purposes. In our studies we used the species Sideroxylon obtusifolium, given its utilization in the folk medicine due to its anti-inflammatory and hypoglycemic properties, to investigate the presence of lectins in this species. We tested many parts of the plant and the bark showed better conditions for this work. During the experiments using extract of the plant bark with tampon citrate phosphate in pH 6.5 and in the concentration to 10%, it was verified an activity haemaglutinant relatively expressive with the result of HA 131.072, where this activity was determined using rabbit red cell. This experiment confirms the presence of lectin in the species. The proteic concentration was determined using Lowry method. The estimate of the relative protein concentration was 36,62g/ml. The fractions with concentration between 40-60% obtained best results in haemaglutination and protein levels tests. The inhibition tests of the haemaglutinant activity were
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